ΒΑΡΙΑ ΜΥΑΣΘΕΝΕΙΑ
ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΣΗ ΕΝΟΣ ΜΟΝΟΚΛΩΝΙΚΟΥ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ.
ΚΑΙ ΠΡΟΣΤΑΣΙΑ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ
ΤΗΣ ΑΚΕΤΥΛΟΧΟΛΙΝΗΣ ΑΠΟ ΑΥΤΟΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ
Δ. ΠΑΠΑΝΑΣΤΑΣΙΟΥ, Α. ΜΑΜΑΛΑΚΗ, Κ. ΠΟΥΛΑΣ, Η. ΗΛΙΟΠΟΥΛΟΣ, Σ. ΤΖΑΡΤΟΣ
ΣΚΟΠΟΣ Η "ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΣΗ" ΤΩΝ ΜΕΤΑΒΛΗΤΩΝ ΠΕΡΙΟΧΩΝ ΕΝΟΣ ΜΟΝΟΚΛΩΝΙ ΚΟΥ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ (MAB) ΙΚΑΝΟΥ ΝΑ ΠΡΟΣΤΑΤΕΥΕΙ ΤΗΝ ΚΥΡΙΑ ΑΝΟΣΟΓΟΝΟ ΠΕΡΙΟΧΗ (MIR) ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΤΗΣ ΑΚΕΤΥΛΟΧΟΛΙΝΗΣ (ACHR) ΑΠΟ ΤΗΝ ΠΑΘΟ ΓΟΝΟ ΔΡΑΣΗ ΤΩΝ ΑΥΤΟΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΤΩΝ ΜΥΑΣΘΕΝΙΚΩΝ ΚΑΙ ΝΑ ΜΗΝ ΠΡΟΚΑΛΕΙ ΑΝΟΣΟΑΠΑΝΤΗΣΗ ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΟ. ΥΛΙΚΟ-ΜΕΟΟΔΟΣ ΤΟ ΜΟΝΟΣΘΕΝΕΣ SCFV ΤΜΗ ΜΑ ΤΟΥ MAB198 (ΑΠΟΤΕΛΕΙΤΑΙ ΜΟΝΟ ΑΠΟ ΤΙΣ ΜΕΤΑΒΛΗΤΕΣ ΠΕΡΙΟΧΕΣ ΤΗΣ ΒΑ ΡΙΑΣ, VΗ, ΚΑΙ ΕΛΑΦΡΑΣ, VL, ΑΛΥΣΙΔΑΣ, ΕΝΩΜΕΝΕΣ ΩΣ ΜΙΑ ΕΝΙΑΙΑ ΠΟΛΥΠΕΠΤΙ ΔΙΚΗ ΑΛΥΣΙΔΑ) ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΘΗΚΕ (H-SCFV198) ΣΥΝΔΥΑΖΟΝΤΑΣ ΤΙΣ ΠΕΡΙΟΧΕΣ ΠΟΥ ΚΑΘΟΡΙΖΟΥΝ ΤΗ ΘΕΣΗ ΠΡΟΣΔΕΣΗΣ ΣΤΟ ΑΝΤΙΓΟΝΟ (CDR REGION) ΤΟΥ SCFV198 ΜΕ ΤΙΣ ΠΕΡΙΟΧΕΣ-ΠΛΑΙΣΙΟ (FR REGION) ΤΩΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΩΝ ΑΝΟΣΟΣΦΑΙ ΡΙΝΩΝ. Η ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ VΗ ΚΑΙ VL ΑΛΥΣΙΔΩΝ ΠΡΑΓΜΑΤΟΠΟΙΗΘΗΚΕ ΜΕ ΤΗΝ ΑΛΥΣΙΔΩΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΠΟΛΥΜΕΡΑΣΗΣ. ΤΟ ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΜΕΝΟ H SCFV198 ΕΚΦΡΑΣΤΗΚΕ ΣΕ ΔΙΑΛΥΤΗ ΜΟΡΦΗ ΣΕ Ε. CΟLI ΚΑΙ ΑΠΟΜΟΝΩΘΗΚΕ ΚΑ ΘΑΡΟ ΜΕ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑΣ. ΔΗΜΙΟΥΡΓΗΘΗΚΑΝ ΜΟΝΤΕΛΑ ΤΡΙΩΝ ΔΙΑΣΤΑΣΕΩΝ ΤΗΣ ΔΟΜΗΣ ΤΩΝ ΜΕΤΑΒΛΗΤΩΝ ΠΕΡΙΟΧΩΝ ΤΩΝ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΚΑΙ ΕΠΙΛΕΓΜΕΝΑ ΚΑΤΑΛΟΙΠΑ ΤΟΥ H-SCFV198 ΑΝΤΙΚΑΤΑΣΤΑΘΗΚΑΝ ΑΠΟ ΤΑ ΑΝΤΙΣΤΟΙ ΧΑ ΤΟΥ SCFV198 ΜΕ ΤΟΠΟΚΑΤΕΥΘΥΝΟΜΕΝΗ ΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΕΝΕΣΗ. ΑΠΟΤΕΛΕ ΣΜΑΤΑ Η ΣΥΓΓΕΝΕΙΑ ΤΟΥ ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΜΕΝΟΥ H-SCFV198 ΓΙΑ ΤΟΝ ACHR ΗΤΑΝ ΠΟΛΥ ΧΑΜΗΛΗ. ΜΕΛΕΤΩΝΤΑΣ ΤΑ ΜΟΝΤΕΛΑ-ΔΟΜΕΣ ΤΩΝ ΔΥΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΕΠΙ ΛΕΧΘΗΚΑΝ ΤΕΣΣΕΡΑ ΚΑΤΑΛΟΙΠΑ ΤΗΣ VΗ ΑΛΥΣΙΔΑΣ ΤΟΥ H-SCFV198 ΜΕ ΠΙΘΑΝΗ ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΣΤΗ ΔΙΑΜΟΡΦΩΣΗ ΤΩΝ CDR. ΤΟ ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΜΕΝΟ ΤΜΗΜΑ ΑΝΤΙΣΩ ΜΑΤΟΣ ΜΕ ΜΕΤΑΛΛΑΓΕΣ ΣΤΑ ΚΑΤΑΛΟΙΠΑ 27, 29, 30 ΚΑΙ 71 ΤΗΣ VH (H-SCFV-Μ4) ΠΑΡΟΥΣΙΑΣΕ ΠΟΛΥ ΜΕΓΑΛΗ ΑΥΞΗΣΗ ΣΤΗΝ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΣΥΝΔΕΣΗΣ ΜΕ ΤΟΝ ACHR. ΤΟ H-SCFV-Μ4 ΕΙΧΕ ΜΟΝΟ ΤΕΣΣΕΡΙΣ ΦΟΡΕΣ ΧΑΜΗΛΟΤΕΡΗ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑ ΓΙΑ ΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ACHR ΑΠΟ ΑΥΤΗ ΤΟΥ ΑΡΧΙΚΟΥ SCFV198 (ΚD: 323 ΗΜ ΚΑΙ 80 ΗΜ). ΤΟ H-SCFV-Μ4 ΗΤΑΝ ΙΚΑΝΟ ΝΑ ΠΑΡΕΜΠΟΔΙΖΕΙ ΙΚΑΝΟΠΟΙΗΤΙΚΑ ΤΗΝ ΠΡΟΣΔΕΣΗ ΤΟΥ ΑΝΤΙ-MIR MAB198 ΚΑΙ ΕΝΟΣ ΑΝΤΙΠΡΟΣΩΠΕΥΤΙΚΟΥ ΜΥΑΣΘΕΝΙΚΟΥ ΟΡΟΥ ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ACHR. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ (Α) ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗΚΕ ΕΝΑ ΑΝΘΡΩ ΠΟΠΟΙΗΜΕΝΟ ΤΜΗΜΑ ΤΗΣ ΜΕΤΑΒΛΗΤΗΣ ΠΕΡΙΟΧΗΣ ΤΟΥ ΑΝΤΙ-MIR ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ 198. (Β) ΑΠΟΔΕΙΧΘΗΚΕ Η ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΣΗ ΤΟΥ ΝΕΟΥ ΜΟΡΙΟΥ ΓΙΑ ΤΗ MIR ΠΕΡΙΟΧΗ ΤΟΥ ACHR ΚΑΙ Η ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΤΟΥ ΝΑ ΠΑΡΕΜΠΟΔΙΖΕΙ ΤΗΝ ΠΡΟΣΔΕΣΗ ΑΝΤΙ-ACHR ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ. (Γ) ΕΠΙΠΛΕΟΝ ΤΡΟΠΟΠΟΙΗΣΕΙΣ ΣΤΟ ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΜΕΝΟ SCFV ΕΙΝΑΙ ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΕΣ, ΩΣΤΕ ΝΑ ΔΗΜΙΟΥΡΓΗΘΕΙ ΕΝΑ ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΜΕΝΟ ΤΜΗΜΑ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ ΠΟΛΥ ΥΨΗΛΗΣ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑΣ ΚΑΙ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΠΡΟΣΤΑΣΙΑΣ ΤΟΥ ACHR IN VIVO.
Λέξεις-κλειδιά: ΑΛΥΣΙΔΩΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΠΑΛΥΜΕΡΑΣΗΣ, ΑΝΑΣΥΝΔΥΑΣΜΕΝΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑ, ΑΝΘΡΩΠΟΠΟΙΗΣΗ, ΥΠΟΔΟΧΕΑΣ ΤΗΣ ΑΚΕΤΥΛΟΧΟΛΙΝΗΣ
ΑΡΧΕΙΑ ΕΛΛΗΝΙΚΗΣ ΙΑΤΡΙΚΗΣ, 15(4), 356-363, 1998 - Ερευνητική εργασία